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比例电化学生物传感器准确地确定细胞中的弗林蛋白酶活性

2021年01月19日  阅读次数:

原文链接:https://doi.org/10.1039/C7AN01295K
        本文开发一种灵敏而准确的弗林蛋白酶活性方法仍然是理解弗林蛋白酶在细胞表面系统甚至在阿尔茨海默氏病中所起的作用的瓶颈。在这项工作中,基于源于具有多个反应位点的肽和防污金纳米桔梗(GBF)的双重信号放大,开发了一种比例电化学生物传感器,用于灵敏而准确地确定细胞中的弗林蛋白酶活性。首次设计了一种新的肽HS-CMRVRR↓YKDFDFG(P3),可在位点被Furin选择性地切割。更重要的是,该肽P3带有三个–COOH基团的氨基酸残基,随后用于与二茂铁的响应分子结合,可将测定灵敏度显着提高约2.3倍。与此同时,通过大比例的表面积和良好的导电性,以及抗生物结垢的纳米表面来减少细胞中电极表面的生物结垢。这种双重扩增策略可以将弗林蛋白酶的检测灵敏度大大提高6.5倍,这对于检测少量弗林蛋白酶是有利的。另外,将5'-MB-GGCGCGA(T)13 -SH-3'作为内部参照物进行了组装,以提供用于校正由复杂的分析环境导致的确定误差的内置元件。最后,这种灵敏,准确的弗林蛋白酶生物传感器已成功应用于检测弗林蛋白酶过表达的U251和MDA-MB-468细胞中的弗林蛋白酶活性。据我们所知,这是第一个提及检测细胞中弗林蛋白酶活性的电化学方法的报告。

这一研究成果近期发表在RCS旗下期刊Analyst,文章的第一作者是Dazhi Yao,通讯作者为华东师范大学张立敏副教授和田阳教授。